<p “=””>1、精子的搜集
<p “=””> 禁欲期(一般为3~5d)后,用手淫办法将精子搜集于10~20mL无菌的聚丙烯样品搜集容器中。要求禁欲期是为了更好地冷冻保存样品。一般而言,这样的精子与搜集前禁欲期较短及不规则的精子相比,冷冻保存后的特性更稳定且更完善。<p “=””> 射出的精液是液态的,生育医疗但正常状况下当即凝结成胶状。凝结后的精液一般在30min内液化,此刻就可测定其体积。生育医疗为了使精子取得较大的冷冻存生机,应在搜集精液后1min内开端对液化精子进行冷冻保存处理。<p “=””> 2、体积的丈量
<p “=””> 生育医疗体积可用较准的加样器或带针头的5mL注射器来丈量,有时也可依据搜集精液前后采样瓶的分量之差来计算。取0.1~0.2mL精液作精液剖析(活动精子的百分数及其质量、精子密度等,拜见本书有关章节),此外尚需取出一些精液,一起以用来做挑选某种性传染疾病的检测、进行某些检测以挑选导致性病的微生物如奈瑟淋球菌等(详见有关章节)。<p “=””> 3、甘油化<p “=””> 甘油作为冷冻保护剂,生育医疗可以分步办法直接参加到未经处理的精液之中。每次参加后混匀,时刻距离为1min;或间接地作为扩张液或基液的组分,经稀释后逐步参加精液。而在美国与加拿大,40%以上的闻名精子库,仍单独运用甘油作为冷冻保护剂,而越来越多的新的精子库则运用扩张剂,尤其是含甘油的两性离子缓冲体系。<p “=””> 甘油化的条件不一定触及温度的特别条件(除了室温之外)和触摸时刻(除了参加甘油及混匀所需时刻之外)。<p “=””> 4、包装和存生机查询<p “=””> 甘油化的精液可吸入塑料吸管(可用封口剂,加热,或用尼龙塞来密封)或放入玻璃安瓿(用火焰封口),生育医疗也可放入塑料冷冻管(冷冻小瓶)后用螺口盖拧紧。每份冷冻精液的体积一般是0.4~0.8mL,这可作为人工授精的一个单位。当然如果适宜,人工授精也可能运用一个单位以上的精液,选择用于冷冻保存精子的容器是很重要的。这种容器应是易于符号、操作、储存,相同也应具有很好的生物兼容性以及抗压功用。高质量的聚丙烯吸管或小瓶看来符合这些规范,而没有易碎及被洗涤剂污染等玻璃容器所具有的缺陷。<p “=””> 放入液氮冷冻之前,除了要对被冷冻和储备的精子进行分装以外,生育医疗还需预备一份质量操控检测样品。对搜集后未经处理的精液、用冷冻保护剂处理过的精液以及储存前、冻融后的精液均应查询其中的活动精子及其活动力。经过查询能追踪冷冻保存各阶段的精子生计状况,生育医疗并能保证了解冷冻精子的存活才能。<p “=””> 5、冷冻
<p “=””> 吸管、安瓿中的精液冷冻保存时可涣散或成组储存,其方位保持笔直、水平或歪斜。一般是放在液氮气雾中,生育医疗有时也可放在机械(电子)冷冻柜的冷冻气中。冷却和冷冻过程则可用人工以静态或逐步办法,也可用电脑操控的液氮供应体系来完结。常用的是操作者利用液氮储存容器中的气相以直接一次性或逐步办法进行冷冻。带有吸附液氮的石棉衬垫的生物枯燥运送器,生育医疗也能在气相中用于冷冻,然后在液相中转移到储存容器。<p “=””> 6、储存<p “=””> 经分装的样品,均应储存在金属容器内的液氮之中,而这些容器则应放置在适当的液氮冷冻箱之内。用以监督液氮水平面的设备[机械的和(或)电子的]是为了长时间储存在高于液氮温度( -196℃)的状况下避免损失精子功用,监督水平面的常见机械(手艺)办法是将一根带刻度的插杆笔直放入液氮底部后拔出,则在其上面就会构成一条霜线,以指示液氮水平面,至于各种杂乱的部分和遥控电子警报体系现许多国家均已有市售。另一方面,少量精子库只运用闪耀灯定时用肉眼检查,AATB的安排库规范只要求一个有用的监测程序,以保证样品一直储存在液氮外表之下。冷冻生物学家和有关研究人员,经过融解储存前样品,并进行检测,发现在冷冻刚开端期间精子活动力有某些丢掉。但是以后储存在液氮外表之下-196℃的冷冻精子,生育医疗活动力没有进一步丢掉,人们已经证实癌症患者医治前精液中的精子冷冻生计活动力往往是差的(冻结后精子活动力百分数下降),尽管如此,这下降了的运动才能在长时间储存期间并不进一步下降。
<p “=””> 在所查询的42家AATB成员的安排库中,只要2家报导了精液[由正常供精者及(或)医治前患者供给]长时间保存期间精子活动力损失的例子。还有报导只要1例冷冻保存3年后精子活动力损失。可以为人们所承受的观念是,生育医疗储存过程中精子活动力损失系冷冻前没有精确测定所造成的或更可能是因为没有保证较佳储存条件所造成的。<p “=””> 7、冻结<p “=””> 将装有冷冻精子的包装盒露出于空气或水中即可使冷冻精液康复液态。一般露出在室温,但也可露出在其他温度下,这要依据各精子库设计的办法学而定。<p “=””> 8、分发<p “=””> 若临床医生需求冷冻精子以开展IVF-ET,精子库应按要求送到该医生地点医院(或)诊所。冷冻精子从精子库的储存柜取出后应放在预先盛有液氮或固体二氧化碳(干冰)的特别运送盒内。但是,精子库若就在医院内,且离操作室甚近,则可不用放在上述特别运送盒内,而可直接送到操作室供医生运用。冷冻精子在送临床运用前的消融有助于经过质量操控,再次评价精子冷冻存活状况。